عنوان اختراع: ساخت هیدروژل هیدروكسی اتیل سلولز به كمك شیمی كلیك جهت ترمیم ضایعات غضروفی

خلاصه اختراع

در این اختراع، برای اولین بار، هیدروژل هیدروكسی اتیل سلولز (HEC) از طریق شبكه ای شدن به كمك واكنش شیمی كلیك حلقه زایی آزید- آلكین پیش رونده با فشار حلقه با موفقیت سنتز شد. براساس نتایج FTIR، تشكیل حلقه تریازولی در نمونه هیدروكسی اتیل سلولز اصلاح شده با آلكین، آزید تأیید شد. همچنین، مطابق با آنالیز H-NMR، وجود پیك مربوط به CH2-triazole اتصال موفق مولكول های شیمی كلیك به هیدروكسی اتیل سلولز اصلاح شده را نشان داد. بررسی استحكام كششی نمونه هیدروكسی اتیل سلولز كراس لینك شده با شیمی كلیك در مقایسه نمونه كراس لینك شده با سیتریك اسید، حاكی از افزایش قابل توجه مدول الاستیسیته، استحكام كششی و افزایش كرنش در نقطه شكست بود (افزایش استحكام كششی از حدود 13/0 مگاپاسكال به حدود 57/0 مگا پاسكال؛ افزایش مدول یانگ از حدود 6/5 مگاپاسكال به حدود 10 مگاپاسكال و افزایش كرنش از حدود 2/3 درصد به حدود 9/5 درصد). بررسی نتایج تورم پذیری، شبكه ای شدن بهتر نمونه هیدروكسی اتیل سلولز حاوی مولكولهای بیوارتوگونال را نسبت به نمونه هیدروكسی اتیل سلولز حاوی سیتریك اسید نشان داد؛ به طوریكه پس از گذشت 10 روز غوطه وری در محلول PBS، این میزان از 1600 درصد به 700 درصد كاهش یافت. زنده مانی سلولهای كندروسیتی در نمونه هیدروكسی اتیل سلولز اصلاح شده تریازولی نسبت به نمونه هیدروكسی اتیل سلولز تنها (كنترل: اصلاح شده با سیتریك اسید)، بیشتر بود؛ به طوریكه این مقدار در غلظت عصاره 75 درصد و بعد از گذشت دو روز غوطه وری در محیط كشت، از حدود 90% به 95% افزایش یافت. تصاویر مربوط به رنگ آمیزی Safranin O نشان داد كه ترشحات مربوط به گلایكوزآمینو گلایكن ها (GAGs) از سلول های كندروسیتی در نمونه اصلاح شده تریازولی بسیار بیشتر از نمونه هیدروكسی اتیل سلولز تنها بود. نتایج چسبندگی سلولی نیز، پایك انداختن بهتر سلولهای كندروسیتی نمونه اصلاح شده تریازولی نسبت به نمونه نمونه هیدروكسی اتیل سلولز تنها را تأیید كرد. تست Real-time PCR، بیان بسیار بالاتر دو ژن كلاژن نوع دو و آگریكان در كندروسیت های كشت داده شده بر روی هیدروژل HEC كراس لینك شده با شیمی كلیك را نسبت به هیدروژل HEC تنها نشان داد. در مجموع، هیدروژل HEC كراس لینك شده با شیمی كلیك باعث حفظ بهتر ماهیت و رفتار كندروسیت ها شد.